PCR技術(shù)作為一種新的冠狀病毒核酸檢測方法，已逐漸為人們所熟知。目前，國家衛(wèi)生健康委員會已對獨(dú)立醫(yī)療檢測中心新的PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)，特別是對實(shí)驗(yàn)室區(qū)域提出了明確的指導(dǎo)方案，這是嚴(yán)格要求的。但一般來說，疾控中心和醫(yī)院沒有這么大的實(shí)驗(yàn)室面積，只能根據(jù)現(xiàn)有條件建設(shè)或改造PCR實(shí)驗(yàn)室。由于面積有限，高度又低，如何在這樣的條件下進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)呢？
一、醫(yī)院PCR實(shí)驗(yàn)室平面布局
PCR實(shí)驗(yàn)室基本上由五個結(jié)構(gòu)組成，它們是常見的：PCR專用走廊、試劑制備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增分析區(qū)。每個實(shí)驗(yàn)室都有一個緩沖區(qū)。如果實(shí)驗(yàn)室面積較小，建議將四個區(qū)域改為三個區(qū)域，即試劑制備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)和擴(kuò)增分析區(qū)。甚至兩個區(qū)域，即試劑制備區(qū)和基因檢測區(qū)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際情況，配備相應(yīng)的檢測設(shè)備。此外，如果實(shí)驗(yàn)室的深度較短，建議不設(shè)置PCR專用走廊，但每個實(shí)驗(yàn)區(qū)緩沖室的門必須設(shè)置聯(lián)鎖裝置，每個外門必須設(shè)置門禁裝置。門上必須有可視窗，門上有明顯標(biāo)志，包括：生物防護(hù)等級、操作致病生物因素、實(shí)驗(yàn)室主任、緊急聯(lián)系方式、國際通用生物危險(xiǎn)標(biāo)志等。
2、無論P(yáng)CR實(shí)驗(yàn)室分為四個、三個或兩個獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)，每個實(shí)驗(yàn)區(qū)都應(yīng)有一個獨(dú)立的緩沖室，整個實(shí)驗(yàn)區(qū)是一個完整的緩沖走廊。通過調(diào)整各區(qū)域的氣壓，整個PCR實(shí)驗(yàn)室可以避免氣溶膠的污染。
3、緩沖室、PCR擴(kuò)增區(qū)排風(fēng)機(jī)向外排風(fēng)，外墻及各門設(shè)有風(fēng)量可調(diào)的回風(fēng)口?？諝馔ㄟ^回風(fēng)口交換到室內(nèi)。
4、實(shí)驗(yàn)區(qū)、緩沖室頂部及傳送窗均設(shè)有紫外線燈消毒。試劑制備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū)可配備移動式紫外線燈進(jìn)行消毒。
5、醫(yī)院PCR實(shí)驗(yàn)室可以是分散式的，也可以是組合式的。要完成一套PCR實(shí)驗(yàn)，通常需要經(jīng)過四個實(shí)驗(yàn)過程：試劑制備、樣品處理、核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物分析。如果實(shí)驗(yàn)過程需要，還應(yīng)增加樣品破碎過程。
6、試劑制備和樣品制備區(qū)為微正壓，核酸擴(kuò)增室和產(chǎn)品分析室為微負(fù)壓，防止含核酸氣溶膠擴(kuò)散污染試劑和樣品。通過控制排氣量大于進(jìn)氣量，可以實(shí)現(xiàn)負(fù)壓效應(yīng)。
7、理想情況下，PCR實(shí)驗(yàn)室緩沖室內(nèi)可設(shè)置正壓，防止室內(nèi)空氣外流，室外空氣內(nèi)流。
8、如果房間的深度允許，可以在PCR內(nèi)設(shè)置專用走廊。需要指出的是，緩沖室在減少室內(nèi)外空氣交換方面比專用走廊更為重要。
9、各區(qū)域應(yīng)有單向?qū)嶒?yàn)流程、物流、人流和氣流，形成單向過程的防護(hù)屏障，避免實(shí)驗(yàn)干擾和實(shí)驗(yàn)過程中核酸氣溶膠污染的假性結(jié)果。
10、如果實(shí)驗(yàn)室整體房間較低，可考慮在走廊或?qū)嶒?yàn)室外設(shè)置新風(fēng)機(jī)和排風(fēng)機(jī)。風(fēng)管應(yīng)為圓形或扁平。鋪設(shè)后，應(yīng)進(jìn)行壓力和漏氣試驗(yàn)。風(fēng)管接口及閥門嚴(yán)格按照施工工藝操作，盡量減少拆除夾層的維修頻率。pcr實(shí)驗(yàn)室升級建設(shè)三、醫(yī)院PCR實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)備按標(biāo)準(zhǔn)四區(qū)劃分，各區(qū)設(shè)備基本配置如下：1、試劑制備區(qū)：主要用于貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合物的制備。試樣制備所用試劑和材料應(yīng)直接運(yùn)至該區(qū)域，不得通過其他區(qū)域。試劑的原材料應(yīng)存放在該區(qū)域，并在該區(qū)域準(zhǔn)備所需的貯存試劑。所需儀器設(shè)備包含超凈臺、天平、移液器、混勻儀、冰箱（不需要-80）、離心機(jī)、加樣器、振蕩器、消毒車、滅菌鍋等。
2、樣本制備區(qū)：臨床標(biāo)本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測定RNA時(shí)DNA的合成。所需儀器設(shè)備包含冰箱（-80）、生物安全柜、離心機(jī)、移液器、消毒車、混勻儀、超凈臺、加樣器、振蕩器、恒溫水浴等。
3、核酸擴(kuò)增區(qū)：主要是DNA擴(kuò)增，已制備的DNA模板和合成的DNA和主反應(yīng)混合液，制備成反應(yīng)混合液等，也可以在本區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。在PCR測定中，通常在擴(kuò)增后須打開反應(yīng)管。所需儀器設(shè)備包含基因擴(kuò)增儀、熒光定量PCR儀、核酸提取儀、移液器、超凈臺、消毒車、超凈臺、冰箱、離心機(jī)、加樣器等。
4、產(chǎn)物分析區(qū)：主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測定。所需儀器設(shè)備包含酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、移液器、消毒車、加樣器、水浴箱等。此外，部分檢測可能還用到電泳儀、凝膠成像系統(tǒng)/紫外檢測儀以及電爐等。
除了以上幾點(diǎn)之外，在醫(yī)院PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)過程中一定要規(guī)范安裝工藝和綜合服務(wù)工藝，嚴(yán)格按照安裝工藝規(guī)范、科學(xué)設(shè)計(jì)。安裝前需確定以下安裝條件，如：電源電壓、電源進(jìn)線位置、電話網(wǎng)進(jìn)線位置、進(jìn)水壓力、最小安裝空間、地面平整度、通風(fēng)孔位置、進(jìn)水管和落水管、理想空間尺寸和通風(fēng)孔尺寸。而且在PCR實(shí)驗(yàn)室建成后，也需要進(jìn)行嚴(yán)格的管理。
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